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    采用mNGS法診斷布氏桿菌性脊柱炎1例

    2019/3/14 作者:曾敬 趙洪普 尹德龍   來源:中國骨與關節損傷雜志 我要評論0

    布氏桿菌病是一種臨床較少見的人畜共患疾病,由布氏桿菌屬引起,常侵犯肌肉和脊柱,形成布氏桿菌性脊柱炎。布氏桿菌性脊柱炎臨床癥狀表現不一,影像學表現缺乏特異性,臨床診斷困難,誤診率高。筆者于2018-05采用基于宏基因組學的二代測序技術(mNGS)診斷布氏桿菌性脊柱炎1例,報道如下。

    病例報道

    患者,男,71歲,主訴下腰痛伴腰椎活動受限6個月,反復就診治療,效果不佳。腰椎X線片顯示L4椎體下終板骨質破壞,L4、5椎間隙無明顯變化。腰椎CT顯示L4、5椎體骨質破壞,L4、5椎間盤內異常密度影,椎間盤內異常密度影,椎旁、椎管內軟組織密度影。腰椎MRI顯示L4、5椎體及雙側椎弓骨質改變,L5椎體后緣軟組織腫塊,L4、5椎間盤膨出并輕度向后突出,腰椎棘突間及腰后部肌群異常信號。入院時白細胞9.61×109/L,中性粒細胞絕對值8.12×109/L,超敏C反應蛋白111.90mg/L,紅細胞沉降率105mm/H,降鈣素原0.20ng/ml,腫瘤壞死因子24.80pg/ml,其他檢驗結果(HLA-B27、癌相關蛋白、結核T斑點、結核抗體、血培養)未見異常。L4椎體穿刺活體組織病理檢查:骨髓增生較活躍,部分骨質壞死,骨小梁間纖維組織增生伴急慢性炎細胞浸潤。穿刺液培養192h,結果為陰性。考慮腰椎感染性病變,經驗性抗感染治療后超敏C反應蛋白、降鈣素原下降,但患者癥狀無明顯改善。再次穿刺L4、5椎間盤,送病灶組織液進行檢測,感染病原高通量基因檢測(華大基因,mNGS法)結果顯示布魯菌屬核酸序列數為1158copies/μL,初步診斷為布氏桿菌性脊柱炎。行腰椎后路L4、5椎管減壓、椎間盤病灶清除、椎弓根釘棒系統內固定術,術后聯合多西環素、利福平抗感染治療。術后布氏桿菌試管凝集試驗確診為布氏菌性脊柱炎。術后隨訪1個月,患者腰部疼痛緩解,腰椎活動受限減輕。

    討論

    布氏桿菌病是一種人畜共患性傳染病,主要的傳染源是羊、牛及豬,可經皮膚黏膜、消化道、呼吸道傳播至人體,其發病隱匿,分急性、亞急性和慢性病程,病程長,平均病程約21周。布氏桿菌病可侵犯全身各個器官、組織,引起的臨床表現不一。當布氏桿菌病侵犯脊柱時,引起椎體骨質破壞、周圍組織病變及出現神經癥狀,稱為布氏桿菌性脊柱炎。布氏桿菌性脊柱炎雖有較為明顯的影像學特征,如椎體多發性骨質破壞、病灶周圍骨質增生、椎旁或椎管內膿腫,但是缺乏特異性,早期診斷困難。目前布氏桿菌病的診斷主要結合臨床表現、初篩試驗、血清學檢查和分離細菌,臨床表現及初篩試驗可以幫助發現疑似病例,血清學檢查是診斷布氏桿菌病的基礎性檢查,可以用以鑒別多數椎間盤炎性疾病。細菌培養是診斷布氏桿菌病的金標準,由于菌血癥是間歇性的,細菌培養不一定均能獲取陽性結果。另外,經驗性廣譜抗生素使用也會導致血培養的陽性率降低。以往文獻報道顯示,在不同培養時間獲得陽性結果的概率是41%~56%。盡管培養技術及分子生物技術日益發展,在臨床上仍有許多患者因未能診斷明確而延緩治療。

    筆者采用mNGS法輔助早期診斷布氏桿菌病,提高該病的檢出率,達到早診斷、早治療、早痊愈的臨床目的。mNGS法是指對樣本中微生物核酸序列進行分析,通過與數據庫中已有微生物的核酸序列進行比對,從而對微生物進行鑒定。隨著這項技術的發展,mNGS法正逐步從科研轉向臨床,引起了越來越多臨床工作者的關注。Thoendel等報道了1例采用mNGS法診治的人工膝關節感染,該病例在臨床培養和PCR檢測均為陰性情況下,采用mNGS技術檢出致病菌唾液支原體,指導臨床靶向用藥。Thoendel等針對mNGS技術設計了一項臨床大樣本的對照研究,收集了408份關節置換手術失敗患者的關節假體超聲清洗液樣本,根據人工骨關節感染診斷標準分為感染因素和非感染因素兩大類,同時用傳統培養與mNGS法檢測樣本中的病原體,結果顯示感染樣本(213例)中傳統培養方式培養陽性115例、培養陰性98例,mNGS法培養陽性109例、陰性43例,非感染樣本(195例)中mNGS法檢測出潛在致病菌7例。Street等的研究也得出了相似的結論,與傳統培養方法比較,mNGS法敏感性和特異性較高。

    與傳統培養方式相比,mNGS法具有以下優點:①檢出病原菌速度快;②感染通量高;③起始樣本量低;④對文庫片段或擴增子“無偏倚”測序;⑤樣本清潔性要求低;⑥無微生物種類限制。mNGS法檢測整體陽性率更高,尤其是針對培養陰性的樣本。布氏桿菌性脊柱炎患者臨床表現特異性低,影像學檢查雖然可以早期提示該病的可能,但是難于同其他疾病鑒別。患者就診時往往處于亞急性或慢性期,血培養陽性率低。mNGS技術為布氏桿菌性脊柱炎的診斷提供了一種新的思路,可以取患者血液、腦脊液、病灶滲出液等進行檢測,早期明確診斷,選擇有效的治療方案,減輕患者的痛苦。

    原始出處;

    曾敬,趙洪普,尹德龍,鄭兆寬,呂玉明,秦礎強.采用mNGS法診斷布氏桿菌性脊柱炎1例[J].中國骨與關節損傷雜志,2019,34(01):103-104.



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